你知道在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中該如何避免污染嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、培養(yǎng)環(huán)境:
1)無(wú)菌室:保持清潔,經(jīng)常擦洗,使污染物不易積聚。
2)超凈臺(tái):
①定期維護(hù)和保養(yǎng),按廠家規(guī)定定期清洗和更換空氣濾器,經(jīng)常保持清潔并用75%乙醇消毒;
②操作前提前30 min啟動(dòng)超凈臺(tái)紫外燈消毒;
③存放的物品應(yīng)全面消毒,并盡可能只將立即使用的物品放入;
④細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)應(yīng)盡量保持層流,避免氣霧狀污染物進(jìn)入培養(yǎng)器皿;
⑤操作中濺出的液體應(yīng)及時(shí)擦去,并用75%乙醇擦拭消毒;
⑥實(shí)驗(yàn)完畢后,移走所有物品,并用75%乙醇擦洗工作臺(tái)。
二、物品的消毒滅菌
①操作前應(yīng)做好所用器皿、試劑的消毒滅菌工作;
②高壓蒸汽滅菌是常用的方法,不能采用此法滅菌的器皿、試劑,應(yīng)采用其他消毒滅菌方法,如培養(yǎng)基等試劑可過(guò)濾除菌,蓋玻片等器械可用75%乙醇浸泡消毒后置于無(wú)菌環(huán)境中晾干;
③若物品消毒滅菌后長(zhǎng)時(shí)間未使用,應(yīng)重新處理。
三、無(wú)菌操作
防止污染的關(guān)鍵在于嚴(yán)格無(wú)菌操作。無(wú)菌意識(shí)不強(qiáng)、動(dòng)作不準(zhǔn)確、操作不熟練等都會(huì)造成污染。注意事項(xiàng)主要如下:
①細(xì)胞培養(yǎng)的操作一定要在超凈臺(tái)等層流裝置內(nèi)進(jìn)行,無(wú)菌的試劑、器械一定要在無(wú)菌區(qū)開(kāi)封;
②操作時(shí)減少交談、咳嗽等防止來(lái)自唾沫和呼出氣流造成的污染;
③培養(yǎng)試劑不宜過(guò)早開(kāi)瓶,操作時(shí)應(yīng)盡可能保持瓶體傾斜,所有瓶口不能與超凈臺(tái)的風(fēng)向相逆,使用后應(yīng)立即封閉瓶口;
④培養(yǎng)的細(xì)胞處理前也不要過(guò)早暴露于空氣中;
⑤不要在打開(kāi)器皿上方操作;
⑥不允許用手觸及器皿的無(wú)菌部分(如瓶口、瓶蓋內(nèi)側(cè))。
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