ATCC,全名為:American Type Culture Collection,細胞庫的細胞數量排名qian列。ATCC細胞培養方法,廣泛應用于生產領域和生物醫學研究,已成為細胞培養的標準。該方法共分為6大步驟,分別是:
一、培養基的選擇:細胞種類不同,培養基的選擇不同,常見的培養基有:MEM培養基、RPMI培養基、DMEM培養基等。根據細胞類型不同,選擇性的加入10%的胎牛血清、抗生素、抗真菌藥物等。
二、細胞的準備:取出細胞,置于無菌條件,用PBS(含有鈣和鎂)2-3次洗滌細胞,去掉凍存液。
三、細胞的接種:將細胞轉移到無菌培養皿(含有培養基)。培養皿容積應根據培養時間、細胞數量來確定。
四、細胞培養:將培養皿放置在37℃的培養箱中,保持濕潤的環境。定期更換培養基(頻率為:2天/次)。細胞密度需要控制,不要過度密集。
五、細胞分離:細胞密度達到一定程度后,用胰酶或EDTA等酶類將細胞進行消化,消化后的細胞分離到新的培養皿中。
六、細胞凍存:細胞密度適中時,用液氮來凍存細胞。
注意:1.細胞培養的整個過程都需要消毒處理,防止細胞被污染 。
2.定期檢查細胞的各項指標,如生長情況、細胞狀態、是否污染等。
上述ATCC細胞培養方法,助您細胞培養一臂之力!