數字PCR突變檢測介紹
數字PCR(digital PCR,dPCR)通過將微量樣品進行微滴化處理,即稀釋和分液,直每個細分樣品中所含有的待測分子數一般不超過1(0或1)個,將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬個納升級的微滴。再將所有微量樣品在相同條件下進行PCR擴增反應,使含有目標分子的微量樣品中的目標分子增加成千上萬倍,產生強的熒光信號,后對發生了擴增反應的微量樣品進行統計,有熒光信號的微滴判讀為1,沒有熒光信號的微滴判讀為0,根據泊松分布原理及陽性微滴的個數與比例即可得出靶分子的起始拷貝數或濃度。
數字PCR技術在稀有突變檢測、microRNA表達、無創產前篩查、拷貝數變異、測序文庫定量、評估基因編輯效率(GEF)等方面有著很大的應用潛力,未來將會得到進一步的發展。
技術原理
技術優勢
1、高靈敏度:通過放大單分子信號,有效消除背景噪音。
2、高準確性:能夠實現定量初始模板中的分子數。
3、檢測限超低:能夠檢測出微量突變和低拷貝量分子。
與普通熒光定量PCR的區別
傳統的實時定量PCR(qPCR)技術依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,是一種相對定量技術。在靶分子數目極少或者模板濃度差異細微時,其檢測靈敏度、度都受到很大限制。
作為第三代PCR技術的數字PCR,通過精細的微滴化處理,能夠直接檢測統計目標核酸分子的數目,不再依賴任何參照,可確定低單個待測核酸分子,實現定量。
服務內容
1、項目咨詢,包括樣本類型,基因和檢測突變位點的選取。
2、DNA樣本的提取和質檢。
3、引物和探針的設計、合成與優化。
4、實驗操作。
5、數據分析和項目報告。
服務流程
1、提交項目課題相關需求和資料。
2、與我們的專業技術團隊討論項目細節。
3、根據討論后的意見對實驗方案進行修改。
4、雙方均滿意并達成一致,簽訂技術服務合同。
5、開展實驗,按期完成合同規定的內容。
6、結題,提供實驗原始結果和分析結果、實驗流程、實驗條件等等。
我們的優勢
1、提供各種實驗材料和儀器,滿足項目課題實驗需要。
2、專業的操作人員。
3、高規格實驗室。
4、數據結果交付周期快。
5、完善的服務體系,全程跟進,確保滿意。
咨詢與訂購
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